COVID-19 RT-PCR EM TEMPO REAL

CORONAVÍRUS (2019-NCOV) PCR-RT

O RT-PCR é caracterizado pelo isolamento e purificação do RNA viral das amostras do trato respiratório superior e inferior, o qual é transcrito reversamente para cDNA e subsequentemente amplificado no Instrumento de PCR em tempo real.

As amostras respiratórias superiores e inferiores são obtidas através de swabs nasofaríngeos ou orofaríngeos, escarro, aspirados do trato respiratório, lavagem broncoalveolar e lavagem/aspirado nasal ou aspirado nasofaríngeo.

O RT-PCR é o teste recomendado pela OMS para o diagnóstico e monitoração de indivíduos com infecções ativas. O RNA viral torna-se detectável desde o primeiro dia dos sintomas e seu pico ocorre na primeira semana dos sintomas. O declínio da carga viral começa a ocorrer a partir do 10º ao 11º dia do início da sintomatologia, mas ainda pode ser detectada até o 28º dia do início dos sintomas em pacientes recuperados. Ressalta-se que alguns estudos mostram que a carga viral detectada a mais de 20 dias ocorreu em um terço dos pacientes, sendo que a detecção prolongada representa um desafio para as limitadas instalações de isolamento hospitalar, uma vez que os pacientes podem não receber alta até o RNA viral se tornar indetectável. Entretanto, ainda não se sabe se esses pacientes continuam eliminando vírus vivos, já que a soropositividade concomitante pode caracterizar que os virions estão revestidos com anticorpos do hospedeiro, tornando-os não infecciosos.

Instruções:

• - Pacientes com suspeita de Covid-19 é indicado realizar o RT PCR entre o 3º e 7º dia de  sintomas.
• - A coleta deve ser combinada: swab nasofaringe e swab orofaringe.
• - Para esta coleta será necessário a utilização de tubo estéril com 3,0 mL de salina.
• - O tipo de swab a ser utilizado deve ser o swab de algodão ou rayon.
• - Após a coleta o swab deve ser colocado em frasco estéril com salina.
• - Orientar o paciente ou acompanhante quanto ao procedimento a ser realizado.
• - Lavar as mãos e calçar as luvas de procedimento.
• - A coleta deve ser combinada de swab de nasofaringe e orofaringe.
• - Introduzir delicadamente o swab em uma das narinas até encontrar resistência na parede
•   posterior da nasofaringe realizando movimentos rotatórios.
• - Utilizando este MESMO swab, repetir o procedimento de coleta na outra narina.
• - Introduzir novo swab na orofaringe para coleta de material.
• - Introduzir todos os swabs (nasofaringe e orofaríngeo) no mesmo tubo contendo salina e
•   enviar congelado.
• - Cortar a ponta da extremidade que não está dentro da salina, caso necessário.

Fonte: Maricondi